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最近，经常有病友在微信群中询问穿孔素，颗粒酶、NK细胞活性等问题。今天，就我所了解的一点知识，给大家吹一波牛吧。
首先，从原发性噬血细胞综合征吹起吧。现在普遍认为原发的噬血 ，实质是因为细胞毒功能 缺陷导致的过度免疫激化和失控，而引起的一系列的炎症反应。
那么，什么是细胞毒功能？在度娘上可以搜索到一大堆专业解释。主要是指自然杀伤细胞（NK细胞）和细胞毒性T淋巴细胞（CTL细胞）通过脱颗粒释放穿孔素和颗粒酶杀死靶细胞的过程。
我个人是这样理解：大家都知道有很多疾病需要化疗治疗，而化疗药物是毒药，它可以杀死或抑制体内的肿瘤细胞。（多说一句，除了肿瘤引起的相关噬血外，其他噬血中并没有肿瘤发生。在治疗噬血中使用的化疗药物是用来抑制过度活化的细胞毒性细胞的，就是我们说的NK和CTL以及巨噬细胞）而穿孔素和颗粒酶就是人体内自带“化疗药物”，NK和CTL杀死靶细胞的细胞毒功能实现过程就是人体“自我化疗”的过程。和医生注射到我们体内的化疗药物对这种细胞敌我不分不同的是，NK和CTL可以特异性杀死进入体内的病毒，细菌以及被感染的细胞，细胞毒功能实现过程的可以说是具有靶向作用的化疗过程。
通过上面解释，可以了解到具有细胞毒功能的细胞是NK和CTL。这就是为什么在噬血检查中，一定会有NK和CTL细胞活性检查的原因。这也是为什么也要有穿孔素蛋白和颗粒酶B表达检查的原因。
（俺再多说一句，在人体内表达的颗粒酶有5种，分别是A、B、H、K、M。其中颗粒酶B最牛B，诱发细胞凋亡能力最强，被研究的也最多）
NK和CTL在人体内就像是医生，它们专门在体内寻找病毒细菌以及被感染的细胞，找到之后就对其进行释放穿孔素和颗粒酶进行化疗，宣判这些靶细胞的死刑。至于NK和CTL如何精准的找到这些靶细胞，而不会误找其他健康细胞，我可以找机会再给大家吹一下。或者先看看论坛里那个《烤串篇》了解一下，里面涉及到了那么一点这方面的内容。今天主要吹的是如何化疗的。
前面说的人体自带“化疗药物”穿孔素和颗粒酶存在于NK和CTL细胞中。不幸的是它们都无法直接穿过细胞膜直接进入靶细胞内。但是幸运的是在细胞内，有种叫做囊泡的小泡泡可以帮着穿孔素和颗粒酶穿过NK和CTL的细胞膜到细胞外部来，对靶细胞进行杀伤。这个功能叫做细胞毒细胞（NK和CTL）的脱颗粒功能。
现在好多单位出入都要有出入门证。如果没有的话，就会被拒之门外。但是如果坐到一辆有出入门证的车上的话，往往会非常顺利的进出该单位的大门。哪怕是这辆车停在大门口，里面人从车上下来大摇大摆的从门卫面前走过，门卫大概也不会去管这个人有没有出入证了。在这个例子中，大门就是NK/CTL的细胞膜，这辆车就是囊泡，坐到车上的这些人，就是穿孔素和颗粒酶。
另外我悄悄的告诉你，这辆车如果在人体内，就是用CD107a/CD107b/CD63等分子做成的。车停在大门口，相当于这几个分子在细胞膜上表达，尤其是以CD107a为甚。换个说法就是：在囊泡转运穿孔素和颗粒酶并并帮助其穿过细胞膜的时候，会在细胞膜上表达CD107a分子。这也是为什么经常会有CD107a检查的原因。其目的是用来评价细胞毒细胞脱颗粒功能。该功能低下，CD107a的表达就低，说明细胞毒功能无法充分实现。
具体可以参考图1。
再接着吹细胞毒功能的实现过程
细胞毒功能的实现，包括细胞毒颗粒（穿孔素、颗粒酶）合成、NK、CTL内部囊泡合成，囊泡被运输到免疫突触部位、停靠在细胞膜上、与细胞膜融合、释放细胞毒颗粒、和引起靶细胞凋亡等过程。在这一系列复杂的过程中，涉及到好多蛋白共同作用来完成。这个复杂过程中任何一个蛋白有缺陷或着功能不全，都会影响NL/CTL的细胞毒功能，造成其活性低下。其中，就包括我们经常会在论坛或群里讨论到的穿孔素蛋白。另外还包括LYST、RAB27a、Munc13-4、Munc18-2、Syntaxin11、AP-3等其他蛋白。看着熟悉不，这些是不是经常出现基因检测报告中？ （穿孔素、颗粒酶的作用）
首先吹大名鼎鼎的穿孔素基因PRF1，这个基因负责编码穿孔素蛋白。穿孔素蛋白是用来在靶细胞（被感染的细胞）膜打孔的。其作用有两个，一个是在靶细胞膜上打孔形成通道后，使颗粒酶进入靶细胞内部，阻止并分解藏匿于靶细胞内部病毒DNA的复制，造成病毒DNA的死亡；另一个作用是，将靶细胞的细胞膜打成千疮百孔的模样后，改变细胞内外压力，造成靶细胞的凋亡。所以PRF1的缺陷，会造成穿孔素蛋白功能不全。要不它怎么会叫穿孔素呢。
备好货（穿孔素）了，下一步是备车（囊泡）。前边吹过了，这个囊泡表面有CD107等蛋白在表面表达。其实在囊泡的表面，还有一个非常重要的蛋白，叫做Rab27a。这个蛋白的主要作用是让囊泡能在细胞膜上准确停靠。我一般把它理解为车的倒车影像雷达。
有车有货，囊泡也不能在细胞内乱跑，总得遵守点交通规则吧。万一碰坏了细胞内的“花花草草”怎么办？所以，这就需要交警出来指挥交通了。在细胞内，负责这个囊泡转运工作的是AP-3蛋白。它除了和囊泡转运有关外，还在溶酶体合成形成时重要作用。该蛋白功能缺陷，会造成NK和CTL细胞中微管介导囊泡向免疫突触的运动障碍。
在囊泡运行过程中，还有个蛋白是LYST，它会对穿孔素蛋白说，不行哈，你光能穿孔，谁去杀伤靶细胞的内的坏蛋呢？得叫上个帮手----颗粒酶。这个叫LYST的蛋白，是这个车上的乘务员，负责调节溶酶体的聚合与解离以及蛋白分选的。
OK，货准备齐了，交通也顺畅了，目的地还记得是哪里吗？是NK或CTL的细胞膜。可是到了目的地之后，车总不能乱停放吧，乱停车是要罚款的哦。那么好吧，在细胞膜上，有很多停车位（不知道是不是专业术语叫免疫突触），是用Munc13-4这个蛋白来标定的。它和上面提到的倒车雷达RAB27a相互配合，使囊泡妥妥的停靠在细胞膜上。Munc13-4，还和囊泡与细胞膜融合，帮助细胞毒颗粒释放有关系。
除了Munc13-4，还有两个基因参与膜融合的过程。分别是Munc18-2蛋白和Syntaxin11蛋白。突触融合蛋白 syntaxin-ll辅助蛋白Munc18-2结合后可以诱导细胞毒颗粒和细胞膜融合。这三个蛋白，都在细胞的免疫突触位旁边发挥作用。
当囊泡的外膜和细胞膜融合后，穿孔素和颗粒酶就被释放到细胞外，在Ca2+离子的帮助下，去给靶细胞“化疗”去了。
这里涉及到的所有蛋白，都和原发性噬血的基因缺陷有关。
结合图2，再来理解一下这些蛋白的作用。当然也可以参考我在这坛子里第一次吹牛的新人贴《原发性HLH涉及基因及部分基因突变定位》。
因本人非医学专业出身，吹牛当中难免错误，请各位原谅批评并指正。
因本人非美术专业出身，画图写字难免难看，请各位忍着笑死不偿命。
所以我决定招个美女。。。。不对。。。。招美女。。。。咦、又错了。。。招个美，美，美女美工！！！
切记，治病救人专业的事情找专业的医护人员来做。我只负责一本正经的吹牛。
PS：谈一下我个人对基因的一点理解 虽然基因缺陷会造成细胞毒性细胞的细胞毒功能的降低或缺失，但是只是影响了穿孔素和颗粒酶介导的细胞毒功能。对NK细胞来说，还有NK细胞毒因子和TNF等途径，CTL还有Fas/FasL等途径来杀伤靶细胞。这些功能好转了，也能缓解HLH的症状。也能解释有患者虽然穿孔素表达很低，但NK细胞活性还可以。看到基因报告有突变、杂合等也不要紧张，还要区分是一个点还是多个点，是错义还是无义，是等位还是非等位等等。还有突变发生在那个基因上。所以，一定要和主治多沟通，综合考虑。万一需要移植，也要保持好心态，特别是孩子的家长，积极配合。千万不要认为孩子小不懂事，其实孩子什么都能感受到，可能不是说，不会表达罢了。
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发表于 2018-8-8 21:36
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